一文读懂流式TRBC1检测

T 细胞克隆性检测是鉴别良、恶性T细胞增殖的重要依据。流式TRBC1检测通过评估αβ T细胞的TCRβ恒定区表达模式判断克隆性，具有操作简便、快速及样本需求量少等优势，已广泛应用于临床筛查与辅助诊断。

本文系统梳理TRBC1的检测原理、结果判读、临床应用与局限性，为TRBC1检测报告的规范解读提供参考。

 

TRBC1检测原理及生理性表达

 

1.检测原理

T细胞受体β链的恒定区（TRBC）由两个高度同源的基因编码，分别为TRBC1和TRBC2。

成熟T细胞在TCRβ基因重排过程中，会随机、互斥性的选择TRBC1或TRBC2，每个成熟T细胞仅表达一种TRBC亚型。

•正常多克隆T细胞群：表达TRBC1和TRBC2的两类T细胞共存，TRBC1直方图呈双峰分布（见左图）；

•肿瘤性T细胞：来源于单一T细胞的克隆性增殖，仅表达其中一种或缺乏TRBC的表达，称为TRBC限制性表达（单克隆表达）（见右图）。

 

 

目前，TRBC1单克隆抗体已广泛应用于实验室检测，TRBC2抗体也逐步应用于联合判读。

2.健康人群中TRBC1表达特点

2025年一项研究显示¹，健康人外周血CD4+ T细胞TRBC1中位阳性率为38.6%，CD8+ T细胞为26.3%，且CD8+ T细胞的个体差异更大。

 

此外，外周血、骨髓、淋巴结及浆膜腔积液等不同标本，由于T细胞活化程度不同，TRBC1基础表达水平亦存在一定差异（见下表）。

 

3.生理性TRBC1表达水平偏移与T-CUS

年龄增长及持续抗原刺激可能导致少量记忆T细胞一过性扩增，使TRBC1表达水平超过正常阈值，检出少量单克隆T细胞，这种改变属于生理性偏移，通常幅度较小，且不会长期持续存在。

意义未明的T细胞克隆（T?CUS）指在无T细胞淋巴瘤证据的个体中检出少量单克隆T细胞，伴或不伴外周血大颗粒淋巴细胞（LGL）计数轻度升高。目前认为，T-CUS主要由长期抗原刺激驱动CD8+记忆T细胞发生寡克隆扩增，因此以CD8+T-CUS最常见。

 

T-CUS在健康人群中检出率约1%-2%，也可见于血液疾病（如与T细胞免疫反应介导相关的再生障碍性贫血、获得性纯红细胞再生障碍、MDS等）及非血液疾病（如实体器官恶性肿瘤、接受过器官移植的患者、自身免疫性疾病、病毒感染及免疫缺陷病等）中。

 

 

TRBC1结果判读与注意事项

 

1. 判读标准

TRBC1检测主要依据TRBC1阳性细胞比例判断克隆性。目前常用的判定标准为：

•单克隆性：TRBC1阳性细胞比例>85%或<15%，提示TRBC1限制性表达。

•多克隆性：TRBC1阳性细胞比例15%-85%，倾向正常或反应性增生。

但该阈值最初建立于肿瘤负荷较高且存在明确免疫表型异常的病例，对于不同T细胞亚群的病例研究不充分。

随后多个研究团队建立了各自实验室的阳性阈值，例如：

• <10%或>90%¹

• ≤6% 或≥94%²

• 或根据T细胞亚群分别设置临界值（见下表）

 

 

因此，流式TRBC1检测报告中需注明本实验室采用的阳性阈值。

2. 结果解读注意事项

当样本肿瘤负荷较少、无明确肿瘤表型时，结果判读需谨慎。

① 单克隆性不等于肿瘤性

在缺乏明确T细胞淋巴瘤证据的患者中，检出低水平T细胞克隆，应考虑到 T?CUS的情况。

一项大样本研究中³，TRBC1单克隆阳性预测值为66.7%。其中，超半数为T-LGLL表型（CD8+、CD57+颗粒淋巴细胞表型）的T-CUS，长期随访显示，79%的T-CUS克隆比例保持稳定，均未进展为T细胞淋巴瘤。

②多克隆表达不能完全排除T细胞淋巴瘤

同一研究发现³，约0.9%的TRBC1多克隆病例最终确诊为T细胞淋巴瘤，造成TRBC1假阴性的原因主要见于：

•肿瘤类型不适用TRBC1检测（如sCD3阴性或TCRγδ型T细胞淋巴瘤）；

•大量反应性多克隆T细胞掩盖肿瘤克隆信号，如AITL、晚期T-LGLL；

•肿瘤细胞的免疫表型与背景中的正常T细胞高度重叠，无法对肿瘤细胞准确设门。

③TRBC1弱表达时，可联合TRBC2判读

正常情况下，TRBC1阴性群与阳性群相对独立。但部分病例出现TRBC1弱阳性时，单一的TRBC1检测可能出现结果误判。

TRBC1弱表达可能会出现在以下情形：

•真正的低表达；

•TRBC2限制性表达；

•技术原因（抗体染色效果或样本处理问题）。

其中，技术原因可通过参考内对照、调整细胞浓度、更换抗体荧光等方法进行排除。而前两种情形则需要TRBC1与TRBC2联合判断（如下图）：图a中TRBC1表达减弱，联合TRBC2检测后明确为真正的低表达，呈TRBC1限制性表达；图b联合TRBC2检测后明确为TRBC2限制性表达。

 

 

 

TRBC1检测的临床应用

 

1.T细胞淋巴瘤的重要筛查工具

TRBC1检测可用于成熟αβ T细胞来源肿瘤的辅助筛查，包括T-LGLL、皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤等。

流式检测可联合CD4、CD8、CD7、CD5等抗体识别异常T细胞，并同步评估其免疫表型、肿瘤负荷及克隆性。一项纳入1229例样本的研究显示³，流式TRBC1检测用于T细胞淋巴瘤筛查灵敏度达90.7%，阴性预测值达99.1%。

当T细胞具有明确肿瘤相关免疫表型（如表达CD30、PD-1等）时，流式可精确分群，并结合TRBC1评估其克隆性，在肿瘤细胞少量侵犯骨髓（或外周血等体液）时具有明显优势。

2.辅助鉴别反应性与肿瘤性T细胞增殖

部分T细胞淋巴瘤与反应性T细胞增殖在形态学与免疫表型上存在重叠，T细胞克隆性分析可为鉴别诊断提供补充证据。

流式TRBC1检测可快速获取克隆性信息，尤其在TCR基因重排结果尚未回报或结果不确定时，可为临床提供补充证据。

3.辅助监测治疗后微小残留病

对于治疗后的成熟αβ T细胞淋巴瘤，流式细胞学检测可追踪肿瘤相关免疫表型的微小残留T细胞，并通过TRBC1检测明确其克隆性，其检测灵敏度可达0.01%。

 

 

TRBC1检测的适用范围与局限性

 

适用范围：用于αβ T细胞的克隆性评估。

局限性：对于γδT 淋巴瘤和sCD3阴性的T细胞肿瘤，TRBC1检测存在盲区，无法评价其克隆性。

 

总 结

 

流式TRBC1可稳定检出外周血、骨髓、体液中的肿瘤克隆，适用于T细胞淋巴瘤筛查和克隆性判定。但TRBC1结果判读不可仅依靠单一数值，需结合异常细胞负荷、T细胞表面抗原表型、患者临床资料综合分析。结果处于临界值或存在T-CUS时，尤需谨慎；必要时应结合TCR Vβ或TCR基因重排检测共同判断克隆性。

 

 

作者：马跃

 

 

 

参考文献： 

1. Yu S, Kim B, Yoon SE, et al. Flow Cytometric Assessment of TRBC1 Expression for the Diagnosis of T-Cell Lymphoma: Clinical Utility and Pitfalls Related to T-Cell Clones of Uncertain Significance. Int J Lab Hematol. 2025 Oct;47(5):840-848.

2. Chaturvedi A, Raj S, Patil J, et al. Detailed analysis of TRBC1 distribution in T-cell subsets and its application in T-cell clonality assessment. Cytometry B Clin Cytom. 2026 Jul 30.

3. Rajabian N, Axler O, Wistén E, et al. Restricted Expression of the Constant Region 1 of T-Cell Receptor β by Flow Cytometry Facilitates Detection of T-Cell Neoplasms With High Specificity but Moderate Predictive Value[J]. Eur J Haematol, 2026.

4. Shi M, Olteanu H, Jevremovic D, et al. T-cell clones of uncertain significance are highly prevalent and show close resemblance to T-cell large granular lymphocytic leukemia.Implications for laboratory diagnostics[J]. Modern Pathology, 2020, 33:2046-2057.

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6. Shi M, Weybright M J, Otteson G E. Appropriate interpretation of TRBC1-dim positive subsets in T-cell immunophenotyping by flow cytometry[J]. Cytometry Part B, 2025, 108:172-175.

7. Oak J S, et al. A practical approach to panel design, validation, and interpretation for the evaluation of T-cell neoplasms by flow cytometry[J]. Cytometry Part B, 2025.

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9. Chaturvedi A, Raj S, Patil J. Detailed analysis of TRBC1 distribution in T-cell subsets[J]. Cytometry Part B, 2026.

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